ICSI - Intracitoplazmatska injekcija spermija

općenitost

ICSI (intracitoplazmatska injekcija sperme) je tehnika medicinski potpomognutog razmnožavanja (PMA) koja uključuje osjemenje jajne stanice mikro-ubrizgavanjem jedne sperme izravno u nju.

U ovoj praksi, gamete (oocita i spermatozoida) susreću se izvan ženskog tijela, tako da se oplodnja i stvaranje jednog ili više zametaka odvijaju "u epruveti" (točnije, na pločici kulture), a ne na svim unutar jajovoda pacijenta.

Nakon toga, embriji se prenose u maternicu, gdje se implantat odvija, što može dovesti do trudnoće.

ICSI metoda općenito uključuje farmakološku stimulaciju jajnika kako bi se proizvelo više oocita, nakon čega slijedi kirurško uklanjanje istih (ovo je mala intervencija nazvana pick-up ); Umjesto toga, može se izvesti sakupljanje muških gameta masturbacijom, perkutanom ili biopsijom testisa.

U laboratoriju se uzete ženske gamete stavljaju na pločice za kulturu unutar inkubatora, zatim se pojedinačne spermatozoide inokuliraju mikropipetom izravno u citoplazmu oocita.

Ako se jajne stanice uspješno oplođuju, embriji se prenose u maternicu transvaginalnim, ultrazvučnim ili histeroskopskim liječenjem u roku od 48-72 sata.

Pristup ICSI-ju se očekuje tek nakon što liječnik PMA-centra isključi mogućnost prirodnog začeća. Ova tehnika je naznačena, osobito, u slučajevima gdje je prisutna teška muška neplodnost ; zapravo, ICSI omogućuje da se prevladaju poteškoće oplodnje, jer se jedan spermatozoid umeće izravno u citoplazmu oocita.

Uvodne napomene

Medicinski potpomognuta oplodnja (PMA) pomaže parovima koji žele imati dijete, ali ne mogu spontano poduzeti trudnoću. Ovu opciju navode liječnici kao dio puta liječenja, u slučajevima kada se nađe neplodnost barem jednog od dva partnera i ne postoje druge učinkovite terapijske metode za rješavanje ovog stanja.
Svjetska zdravstvena organizacija (WHO) definira neplodnost kao "neuspjeh da se zatrudni u paru nakon 12-24 mjeseca nezaštićenih ciljanih odnosa " (to jest, tijekom dana vjerojatne ovulacije).
Pomoćna oplodnja koristi različite jednostavne ili složene tehnike, uključujući manipulaciju ženskih gameta (oocita), mužjaka (spermija) ili embrija. Metode prve razine uključuju hormonsku stimulaciju, ultrazvučno praćenje ovulacije žena i intrauterinsku inseminaciju (IUI); potonje karakterizira činjenica da se oplodnja odvija izravno unutar ženskog genitalnog aparata. Kompleksni tretmani druge i treće razine, s druge strane, zahtijevaju da se oplodnja prvo provodi in vitro i uključuje: IVF (in vitro oplodnja prijenosom embrija), ICSI i GIFT (intratubarijski prijenos gameta). Ovi postupci su indicirani kada je neplodnost koju treba riješiti ozbiljna i zahtijeva više invazivnih metoda, koje zahtijevaju lokalnu anesteziju i / ili duboku sedaciju.

indikacije

Uzroci koji mogu odrediti neplodnost su mnogi i mogu ovisiti samo o jednom ili oba partnera.

Obično se ICSI tehnika preporučuje u slučajevima:

Tubalni čimbenici : jajovodi (dva kanala koji povezuju jajnike s maternicom) mogu biti opstruirani ili oštećeni iz različitih razloga; to otežava začeće (tj. sastajanje sjemene tekućine s jajnom stanicom) ili spuštanje oplođenog jajašca u maternicu za implantat. Tubalne lezije često ovise o zapostavljenim seksualnim infekcijama (kao što je, na primjer, klamidija), ali također mogu proizlaziti iz prirođenih bolesti, kirurške operacije zdjelice ili prethodne ektopične trudnoće .
Muška neplodnost teškog stupnja : može biti posljedica različitih stanja koja ugrožavaju proizvodnju ili kvalitetu sjemene tekućine, kao što je varikokela (proširena vena u skrotumu), kriptorhizam (neuspjeh ili nepotpuno spuštanje testisa u skrotalnoj vreći) i hormonski deficit (npr. hipogonadotropni hipogonadizam). Drugi uzroci mogu uključivati: kronične infekcije koje uzrokuju abnormalnu sjemenu tekućinu ili uzrokuju djelomično ili potpuno zatvaranje vas deferensa, genetske abnormalnosti i imunološke čimbenike (proizvodnja anti-spermatskih antitijela od strane muškog organizma ili partnera).
Neuspjeh terapijskog postupka tehnike prve razine, tj. Kada medicinsko-kirurško liječenje ili intrauterina oplodnja nisu dali rezultate;
Propuštena ili smanjena oplodnja u prethodnim IVF ciklusima (IVF).

Ostali uvjeti koji zahtijevaju ICSI uključuju:

Neobjašnjiva sterilnost (to jest, ne možete utvrditi utvrđeni uzrok), ako prethodno liječenje (npr. Ciklusi osjemenjivanja) nije dalo rezultate ili je ocijenjeno neprikladnim;
Opstruktivna azoospermija (odsustvo spermatozoida u sjemenoj tekućini, zbog prepreka koje sprječavaju njezinu emisiju s ejakulacijom) i lučenje (nedostatak proizvodnje sperme u testisima);
Smanjena rezerva jajnika : mali broj jajnih stanica u jajnicima zbog napretka žene ili zbog urođenih ili kirurških uzroka;
Endokrino-ovulacijska neplodnost : jajnici ne proizvode oocite zbog uzroka hormonskog podrijetla;
Endometrioza : nenormalan rast tkiva sličan onome koji normalno pokriva unutarnji dio maternice (endometrij) na drugim mjestima; ovo stanje može uzrokovati neplodnost jer često stvara adhezije na jajnicima ili jajovodima.
Čimbenici neplodnosti i muškarca i žene : istodobno postoji više uzroka koji utječu na koncepciju.

Prethodna medicinska istraživanja

Kada se par ne uspije razmnožiti unatoč ciljanom spolnom odnosu, tijekom razdoblja od 12-24 mjeseca, mogu se naznačiti medicinska istraživanja s ciljem provjere neplodnosti barem jednog od partnera.

Prije svega, liječnik se susreće s dva pacijenta i sastavlja povijest bolesti na temelju njihove povijesti bolesti, zatim utvrđuje postoje li čimbenici koji utječu na plodnost (npr. Seksualne infekcije, prekomjerna pretilost ili mršavost, liječenje tumora, pušenje, zlouporaba alkohola). itd.) i preporučuje najprikladniji terapijski postupak za rješavanje reproduktivnog problema.

Ako se stanje koje se susreće ne može riješiti drugim odgovarajućim farmakološkim i / ili kirurškim zahvatima, onda ako je razmnožavanje nemoguće ili je u svakom slučaju vjerojatnost početka trudnoće udaljena (kao u slučaju, na primjer, cijevi koje nisu vidljive ili oštećene, sperma s vrijednostima deficita itd.), liječnici ukazuju na primjenu medicinski potpomognutog rađanja. Usvojeni postupak obično se bira na temelju uzroka neplodnosti koje je predstavio par.

Dijagnostički put za utvrđivanje neplodnosti

Ovisno o profilu para, stručnjak PMA centra može preporučiti određene testove kako bi se isključila prisutnost hormonskih disfunkcija, patologija koje utječu na maternicu i cijevi, abnormalnosti sjemene tekućine i tako dalje.

Za par

Hormonske doze (procjenjujemo razine spolnih hormona prisutnih u krvi kako bismo isključili disfunkcije);
Genetska istraživanja (za procjenu mogućih anomalija);
Imunološki testovi na prisutnost antitijela sperme.

Za čovjeka

Spermiogramma (ispitivanje sjemene tekućine kako bi se procijenio njegov kapacitet gnojidbe i druge temeljne funkcije, kao što su broj, morfologija i postotak pokretnih spermija);
Spermiokultura (analiza sperme za procjenu prisutnosti infektivnih agensa u genitalnim organima).

Za ženu

Histerosalpingografija (za provjeru stanja cijevi i njihove prohodnosti);
Ultrazvuk maternice i jajnika (omogućuje kontrolu ovulacije, količine oocita, prisutnost mogućih cista, fibroida ili drugih formacija);
Histeroskopija (endoskopsko ispitivanje šupljine maternice);
Papa test (citološki pregled koji ispituje prisutnost HPV lezije i promjene stanica na razini vrata maternice);
Potražite infektivne agense (npr. Vaginalni obrisak za otkrivanje uobičajenih patogena kao što su Chlamydia i Candida ).

Kako se to radi?

ICSI metoda se koristi zajedno s IVF-om, s tom razlikom što se metoda oplodnje oocita provodi ubrizgavanjem jednog spermatozoida u citoplazmu.

Isto tako, u ovom slučaju, susret gameta odvija se izvan ženinog tijela (tj. Na pločici kulture). Nakon uspješne oplodnje, embriji se zatim prenose u maternicu.

Dobivanje oocita

ICSI se može izvesti:

U spontanom ciklusu (dakle bez ikakve terapije stimulacije jajnika);
S farmakološkom stimulacijom ovulacije da izazove sazrijevanje više oocita, tj. S indukcijom rasta folikula uz istovremenu proizvodnju više ženskih gameta davanjem lijekova (dnevne doze).

U potonjem slučaju, odgovor jajnika se provjerava:

Praćenje ultrazvukom : provodi se niz ultrazvučnih pregleda, otprilike svaka dva dana, kako bi se promatrao rast folikula, iz kojeg će nastati oociti;
Hormonsko doziranje : uzimaju se uzorci krvi za procjenu izlučivanja hormona povezanih s rastom folikula u jajniku.

Kirurško uzorkovanje proizvedenih oocita i sakupljanje sperme

Nakon stimulacije jajnika da proizvede više folikula, sakupljanje oocita vrši se transvaginalnim postupkom, pod lokalnom anestezijom i / ili dubokim sediranjem. Pod kontrolom ultrazvuka, folikuli su "točke" s iglom i jaje je usisano u njih. U ICSI tehnici, punkcija i aspiracija traju u prosjeku od 5 do 15 minuta, ovisno o broju prisutnih folikula.

Spermija se sakuplja masturbacijom nakon 2-3 dana apstinencije ejakulacije, istog dana kao i uzimanje jaja. U nekim slučajevima sakupljanje muških spolnih stanica se izvodi perkutano ili biopsijom testisa.

Oplodnja sakupljenih oocita odvija se istog dana prikupljanja.

Oplodnja jajnih stanica u laboratoriju

Folikularna tekućina se analizira pod mikroskopom kako bi se izolirale jajne stanice, koje se prenose u posebnu tekućinu za kulturu i pohranjuju u inkubator. Istodobno se priprema uzorak sjemena, uz odabir pokretnih i vitalnih spermija.

Zatim prijeđite na jedinstvo i ekstrakorporalno uzgoj gameta. ICSI tehnika se temelji na principu "imitacije" procesa gnojidbe, manipulacijom pod mikroskopskim vodstvom: oocita se drži na mjestu staklenom pipetom i uz pomoć igle se ubrizgava u citoplazmu jedan spermatozoid.

Proizvod ove operacije stavlja se na posebne ploče s medijem za uzgoj koji daje hranjivim stanicama unutar inkubatora. Ova faza je vrlo osjetljiva i odvija se pod strogom kontrolom biologa i embriologa, koji prate sve procese stanične diobe koji će dovesti do stvaranja embrija.

Što se tiče IVF-a, 16-18 sati nakon oplodnje dolazi do oplodnje, tj. Formiranja zigote, gdje se mogu vidjeti dva pronuklea (muško i žensko).

Razvoj embrija i prijenos u maternicu

Nakon 48-72 sata, odabrani su 1 do 3 embrija koji se prenose u maternicu. Uzorak se unosi u tanki plastični kateter i ginekolog kanalizira do kraja maternice. Uvođenje embrija traje samo nekoliko minuta i općenito je bezbolno.

zamrzavanje

U granicama propisa koji su na snazi, embriji koji nisu preneseni zamrznuti su u tekućem dušiku, pa su pohranjeni u banci uzorka. ICSI tehnika može, zapravo, predvidjeti uporabu gameta ili novooplodnih embrija (" svježih ciklusa ") ili krioprezervacije, koji se dovodi i održava na vrlo niskim temperaturama (" ciklusi odmrzavanja ").

Ako se trudnoća ne dostigne u prvom pokušaju, embriji ili oociti koji su prethodno kriokonzervirani mogu se koristiti za naknadne cikluse liječenja.

Stopa uspjeha

Tehnika ICSI povezana je s visokim postotkom oplodnje sa stvaranjem embrija (spermatozoon je pošteđen od prelaska prekrivenu membranu) i ima dobar uspjeh u prisutnosti teške muške neplodnosti. U slučaju azoospermije, u stvari, tehnika se može izvesti pomoću gameta prisutnih u testisima ili u epididimisu, odakle se uzimaju aspiracijom ili mikrokirurgijom (slično biopsiji). Jedini uvjet potreban za primjenu ICSI-ja je u stvari vitalnost spermatozoida.

Stopa uspješnosti trudnoće je također dobra (općenito govoreći, procjenjuje se da je oko 20% po ciklusu). Ishod liječenja ovisi o kvaliteti embrija koji se prenose in vitro i na sposobnost maternice da ih primi.

Rizici i moguće komplikacije

Odgovor na različite terapijske protokole za izazivanje ovulacije mora se kontrolirati (ultrazvučnim pregledom jajnika i / ili hormonskim dozama) kako bi se izbjegla hiperstimulacija jajnika, odnosno prekomjerno sazrijevanje folikula i proizvodnja jaja.
Ovo stanje može uključivati različite simptome, kao što su nedostatak daha, mučnina i povećanje jajnika, koje su bolne, što uzrokuje nelagodu kod pacijenta; u najtežim slučajevima može doći do trbušne distrakcije i stvaranja krvnih ugrušaka, što bi moglo zahtijevati hospitalizaciju.
Peritonealne infekcije su jedna od mogućih posljedica laparoskopskih postupaka povezanih s ICSI tehnikom, s ciljem pronalaženja jajnih stanica.
Nadalje, potrebno je prijaviti veću vjerojatnost višestrukih trudnoća, jer kako bi se povećala mogućnost za nastanak začeća, tijekom postupka ICSI, nekoliko embrija može biti preneseno unutar maternice. Višestruka trudnoća nosi rizike za zdravlje majke i djece, za koje je veća vjerojatnost da će biti prijevremeno rođena i da imaju manju težinu na kraju trudnoće.