Što je antibiogram?
Antibiogram je mikrobiološki test koji se koristi za ispitivanje osjetljivosti mikroorganizma na jedan ili više antimikrobnih lijekova.
Iskorišten uglavnom na sanitarnoj razini, antibiogram se tradicionalno provodi na uzorcima bakterijskih kolonija izvedenih iz jedinica uzetih brisom ždrijela, uretre, rektuma ili vagine, ili izoliranim iz fecesa, uzoraka urina ili sputuma.
Izvršne tehnike i otpornost na antibiotike
Antibiogram se često izvodi metodom difuzije agara, koja se također naziva Kirby-Bauer tehnikom.
Tijekom postupka uzet je bakterijski uzorak iz kolonija i zasađen (prikladno odložen) na odgovarajuće tlo, u kojem su također raspoređeni diskovi natopljeni antibioticima u poznatim koncentracijama (diktirani terapijskim potrebama). Ploča se zatim stavi u inkubator i nakon unaprijed određenog vremenskog perioda (npr. 18 sati na 35 ° C) može se uočiti relativno ujednačen rast mikroorganizama, s više ili manje širokim halosima oko papirnatih natikača. Na temelju opsega tih područja inhibicije procjenjuje se osjetljivost bakterije na svaki pojedini testirani antibiotik: ako je promjer velik, mikroorganizam je osjetljiv na lijek (S), dok ako je mali, bakterija ima srednju osjetljivost (I ili MS), a ako je ispitivana vrsta bakterija zanemariva ili čak odsutna, otporna je (R) na lijek. Da bi se točno odredila osjetljivost bakterija, promjer halosa inhibicije mjeri se u mm, uspoređujući dobivene vrijednosti sa standardnim vrijednostima za bakterijski soj.
Kako spriječiti rezistenciju na antibiotike
Antibiotici nisu učinkoviti protiv virusa; Tipične virusne infekcije su prehlade, gripa, laringitis, bronhitis, sapi i većina grlobolja (faringitis).
Upotreba antibiotika kada nisu potrebni (na primjer za prehladu ili gripu) može dovesti do razvoja rezistencije na antibiotike (bakterije su "otporne na antibiotike" kada se antibiotik ne može ubiti).
NAPOMENA: to je bakterija koja je otporna na antibiotik, a ne na pojedinca. Stoga, čak i ako nikada niste koristili antibiotike, možete razviti infekcije uzrokovane bakterijama otpornim na antibiotike.
Da bi se spriječila pojava rezistencije na antibiotike, FUNDAMENTAL je završiti terapiju koju je propisao liječnik; čak i ako se dobro osjeća da se prerano zaustavi antibiotik.
Kada se tijekom antibiograma stapaju halo susjednih diskova, antibiotici o kojima se radi smatraju se sinergističkim.
Kao alternativa upravo opisanoj metodi, antibiogram se također može provesti na tekućem mediju, procjenjujući - nakon inkubacije - zamućenost koja odgovara različitim stupnjevima razrjeđenja lijeka (vidi dolje).
Antibiogram je sada postao bitan test, s obzirom na široko rasprostranjenu difuziju fenomena rezistencije na lijekove. Odabir pogrešnog antibiotika ili uporaba lijeka širokog spektra kako bi se izbjegao ovaj postupak može zapravo odabrati bakterijske sojeve otporne na djelovanje istih. U članku posvećenom ovoj temi, vidjeli smo kako je ta sposobnost izvorno stečena za spontane mutacije, a potom prenesena na druge bakterije. Stoga nije slučajnost da je otkriće i klinička upotreba mnogih antibiotika išla ruku pod ruku s pojavom bakterija koje su otporne na njihovo djelovanje. Pogrešno, vrlo često, zbog neprimjerenog i pretjeranog korištenja ovih lijekova, na primjer za liječenje virusnih infekcija protiv kojih se dokazuje da su potpuno beskorisne (jedino moguće opravdanje je spriječiti bilo kakvu bakterijsku superinfekciju kod osoba u riziku).
Dva vrlo važna parametra izvedena iz antibiograma su MIC i MBC:
- MIC (minimalna inhibicijska koncentracija; minimalna inhibitorna koncentracija): najniža koncentracija ispitivanog spoja potrebna je za inhibiciju rasta određenog mikroorganizma.
- MBC (Minimalna bakterijska koncentracija): je najniža koncentracija ispitivanog spoja potrebna za uzrokovanje smrti više od 99, 9% date mikrobne populacije.
Za procjenu MIC u krutom mediju antibiogramom, pretpostavlja se da mikrobni agens difundira s diska u agar stvarajući gradijent koncentracije; prema tome, što je dalje od diska, niža je koncentracija lijeka, koja se postupno smanjuje kako bi dosegla kritičnu koncentraciju (minimalna približna inhibicijska koncentracija MIC). Iza ove točke dolazi do konfluentnog rasta, dok je u području koje je najbliže disku rast odsutan.
U antibiogramu na tekućem mediju pripremaju se serije epruveta koje sadrže medij za kulturu i skalirana razrjeđenja (u omjeru 2) antibiotika koje treba testirati. U svakoj od tih epruveta inokulira se standardna količina mikroba; slijedi inkubaciju i ispitivanje istih. Kao što se i očekivalo, u prisutnosti zamućenja bakterijski rast je vidljiv, dok je otopina koja ostaje jasna označava potpunu inhibiciju mikrobnog rasta, naglašavajući optimalnu učinkovitost lijeka. U ovom slučaju MIC (minimalna inhibitorna koncentracija) predstavlja najveće razrjeđenje (tj. Najnižu koncentraciju) antibiotika sposobnog za potpuno inhibiranje rasta mikroorganizma. Umjesto toga uspostavlja se MBC (minimalna baktericidna koncentracija) uzgojem uzoraka uzetih iz tekućeg medija u posebnom krutom mediju i procjenom mogućeg rasta bakterija. MIC će stoga odgovarati koncentraciji antibiotika prisutnog u epruveti u kojoj je lijek razrijeđen i koji na kulturnom pregledu ne pokazuje znakove bakterijske aktivnosti (vidi sliku).
Rezultati antibiograma objavljeni su u posebnom izvješću, gdje su navedeni antibiotici i srodni MMC; ponekad se navode i asocijacije antibiotika koje se mogu koristiti i stupanj otpornosti mikroorganizama.
Tradicionalne metode izvođenja antibiograma, vrlo korisne u obrazovne svrhe, stalno se razvijaju. Danas su, na primjer, na raspolaganju automatizirani komercijalni sustavi, dok se jastučići od bibula papira mogu zamijeniti trakama koje sadrže inkrementalne doze antibiotika, prikladno označene na samoj traci (E-test za antibiogram).
